谢献胜 $ ，周新民 2 ，王 锋 ’!

（ $< 江苏畜牧兽医职业技术学院，江苏泰州 22;’33 ；

2< 中国农业科学院家禽研究所，江苏扬州 22;33’ ； ’< 南京农业大学动科院，江苏南京 2$33&; ）

卵黄抗体（ !"# ）指从免疫禽蛋中提取出的针对特定抗原的抗体。自 $%&’ 年 ()*+,*-*- 首次报道鸡蛋中存在抗体以来，卵黄抗体的研究不断深入，目前在卵黄抗体的形成、生物学特性等方面已研究得比较清楚，并且卵黄抗体作为诊断试剂和防治药物的研究愈来愈受到关注。本文就免疫鸡卵黄抗体的研究进展作一综述。

1.卵黄抗体的形成

禽类的免疫系统包括细胞免疫和体液免疫，分别受胸腺和法氏囊的控制。当机体受到外来抗原刺激后，法氏囊内的 . 细胞分化成为浆细胞，分泌特异性抗体进入血液循环，当血液流经卵巢时，特异性抗体（主要是 !"/ ）在卵细胞中逐渐蓄积，形成卵黄抗体；当卵细胞分泌进入输卵管时，流经输卵管的血液中含有的特异性抗体（主要是IgA和 IgM ）进入卵清中，形成卵清抗体。 !"/ 移行进入卵细胞是受体作用的结果，因而 可在卵细胞中大量蓄积，浓度高于血液中的 !"/ 。与卵黄抗体相比，卵细胞在输卵管中移行的时间较短，因而卵清抗体含量极微。卵黄抗体在禽胚孵化过程中逐渐进入禽胚血液，为刚出壳雏鸡提供被动免疫保护，在雏鸡疾病预防中具有重要作用，但同时也会干扰鸡疫苗的免疫效果。

2IgY的性质

!IgY 的性质与哺乳动物的 !"/ 相似。正常鸡 的分子量约为 $%3(45 ，由两条轻链（ 26 ）和两条重链（27 ）组成，分子量分别为 839:3(45 和 229’3(45 。其等电点约为 ;<2 。

!"# 与一般哺乳动物 !"/ 相比， !"# 具有较强的耐热、耐酸、抗离子强度和一定的抗酶降解能力。在低于 :;= 条件下， !"# 具有良好的热稳定性。!"# 制剂在 >= 贮存 ; 年或在室温贮存 8 个月其活性仍无明显变化或下降， 8;= 时可保持 2>? 以上， :3=时加热 &3+@A 后其活性才明显下降， 83= ， ’3+@A 条件下巴氏消毒不影响 !"# ；高于 %3= ，大部分 !"# 失去活性。!"# 在 ,7><39$$<3 时比较稳定， ,7’<39’<; 时活性迅速下降， ,7$2 时活性亦有所下降。!"# 对胃蛋白酶有较高的抵抗力，但对胰蛋白酶十分敏感。将胃蛋白酶和 !"# 在 ,72<3 温育 $? 后，几乎所有活性丧失，但在 ,7><3 时 $? 后可保持 &$B 的活性，甚至温育 $3? 后仍有 8’B 活性。 !"# 分别与胰蛋白酶和胰凝乳酶温育 %? ，活性分别保持 ’&B 和 >$B 。’ !"#%*+,-特定病原菌的卵黄抗体能直接黏附于病原菌的细胞壁上，改变病原细胞的完整性，直接抑制病原菌的生长；卵黄抗体可黏附于细菌的菌毛上，使之不能黏附于肠道黏膜上皮细胞；一部分卵黄抗体在肠道消化酶作用下，降解为可结合片段，这些片段含有抗体的可变小肽（ C5D ）部分，这些小肽很容易被肠道吸收，进入血液后能与特定的病原菌黏附因子结合，使病原菌不能黏附易感细胞而失去致病性，而 !"# 的稳定区（ C* 部分）留在肠内。
> !"#./01234

卵黄中的主要成分是蛋白质和脂肪，其比例为$E2 。大部分蛋白质都是脂蛋白，存在于卵黄颗粒中，不溶于水，只有卵黄球蛋白（ ! 、 " 、 # ）是水溶性的，而!"# 是 # 卵黄球蛋白。因此 !"# 的分离纯化首先需要有效地去除卵黄中的脂类，从水溶性蛋白中分离 !"# 。多年来，已建立了许多较为高效而经济的方法，这些方法大多以 FG/ 、硫酸葡聚糖、天然胶，如

免 疫 鸡 卵 黄 抗 体 研 究 进 展谢献胜 $ ，周新民 2 ，王 锋 ’!

（ $< 江苏畜牧兽医职业技术学院，江苏泰州 22;’33 ；

2< 中国农业科学院家禽研究所，江苏扬州 22;33’ ； ’< 南京农业大学动科院，江苏南京 2$33&; ）

收稿日期： 233;H3$H$:

! 通讯作者

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DOI:10.16372/j.issn.1004-6364.2005.10.020

中国家禽

!""# 年第 !$ 卷第 %" 期 !"#$% &’()*+, -’)./012’.34./445

藻酸钠、角叉聚糖或乙醇沉淀等方法初步纯化蛋白

质。

!"#$ 年， %&’(&) 首先提出聚乙二醇（ %*+ ）两步

沉淀法，分别用终浓度为 ,-./ 和 !0/ 的 %*+ 分步

沉淀，用硫酸铵盐析法去除 %*+ 。 !"#. 年，在此基

础上提出了冷乙醇沉淀的改进方法，使产量提高，

而且能有效地去除残留 %*+ 。 !"#! 年 12)(2)(34( 等

提出了硫酸葡聚糖沉淀法 （ 56 法）， %*+ 法和 56

法的产量相当，但提取的 789 制品含有一定量的杂

蛋白。 :;<2 和 6=282>;)) （ !"#? ）用预冷的丙烷和丙

酮（ @0$A ）沉淀蛋白质并去除脂质，经 5*B* 柱层

析进一步纯化，其 789 抗体活性与用 %&’(&) 法提纯

的 789 之间无明显差别，且稳定性好，经 , 次以上

冻融，抗体活性未见改变。 !""0 年 BC3=; 等用水稀

释法（ D5 ）提纯 789 ，每个卵黄可获得 !$$>8 以上

的 789 。此后， BC3=; 等比较了 D5 法、 %*+ 法、 56

法和黄原胶法（ E;)=F;) 法）的提纯效果，结果表明：

D5 法产量最高，其次为 56 法， D5 法更适合大

规模生产。

!"", 年， G&H3C&(F3 提出了冷乙醇分级离心的

方法，分别用 I$/ 、 ,$/ 、 0./ 的冷乙醇沉淀离心，得

到纯度达 ""/ 以上的 789 。此法适用于大规模制备

789 。

工业上大规模生产 789 的方法有：超临界二氧

化碳气体抽提法、卡拉胶法、硫酸铵盐析法。

. 789 !"#$%&’()*+, 

.-! 789 在动物疾病预防方面的应用

研究表明， 789 能抵抗幼龄动物肠道中胰蛋白

酶和胰凝乳蛋白酶的消化。故常在幼畜饲料或添加

剂中加入一定量的针对某些特定疾病的 789 ，以使

其获得有效的被动免疫。何月英等利用小鹅瘟强毒

制备的卵黄抗体，对 0J, 日龄雏鹅进行预防，其保护

率高达 !$$/ 。杨晓梅等用鸭病毒性肝炎 ! 型鸡胚毒

免疫鸡，制备的鸡抗鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体，

经实际应用于预防时，雏鸭的平均成活率为 "I-"/ 。

.-0 789 在动物疾病治疗方面的应用

目前，卵黄抗体已被广泛应用于许多疾病的防

治。汪铭书应用抗鸭病毒性肝炎（ 5GK ）的卵黄抗体

治疗人工感染的鸭时，当用 ! 万倍 L5.$ 强毒时保护

率可达到 !$$/ 。张英等用抗小鹅瘟的卵黄抗体治疗

发病鹅群，治愈率为 ".-0/ 。此外，应用多种病原菌

免疫制备的卵黄抗体还可以防治多种病原菌的感

染。詹丽娥等用 7:5 、 M5 和 *56@NI 三联高免卵黄抗

体治疗上述三种疾病，总有效率可达 ."/ 以上。日本

成功地从鸡蛋中提取出能够杀死幽门螺旋杆菌的

抗体，并以这种抗体为原料制成了能杀死人体内幽

门螺旋杆菌的酸奶。

用卵黄抗体治疗疾病，安全、高效且无公害，我

国已有商品化的卵黄抗体供应。

.-, 789 在动物疾病诊断方面的应用

卵黄抗体和哺乳动物免疫球蛋白有许多不同

之处，如它不与金色葡萄球菌 B 蛋白结合，不与哺乳

动物 OP 受体结合，对哺乳动物补体无固定作用等，

这使得卵黄抗体在检测诊断上具有更强的特异性

和灵敏度，所以卵黄抗体可以应用于免疫荧光试

验、 *L76B 试验、免疫扩散、免疫电泳等。郑厚旌等用

卵黄琼扩实验检验卵黄中的 7:5 抗体水平，结果表

明用卵黄琼扩试验替代血清琼扩试验检测 7:5 抗体

水平是可行的，并且具有经济、省力、省时的特点。

此外卵黄抗体有望取代传统的多克隆抗体的生产，

获取大量更有效的抗体，同时也可减少对动物的副

反应，提高动物的福利。

I 789-./0

789 作为替代抗生素的新型饲料添加剂正在引起人们的关注， 789 取代抗生素用作生长促进剂，不会产生药物残留，是一种安全的绿色添加剂。生产技术较为成熟：用鸡卵黄大量生产、制备多克隆抗体是近年来抗体制备技术中新兴的研究

领域。

789 产量高，价格低廉。

使用 789 技术生产免疫球蛋白，可以减少对动物的应激，提高动物的福利。年龄较大的动物会导致 789 分解失活，然而通过包埋处理可避免这一问题。 6F3>3Q4 等（ !"", ）用脂质体包埋 789 ，在 RG0-# 的胃蛋白酶中 ,NA 温育 !F ，包埋的 789 仍可保存 #$/ 的活性。

综上所述，鸡卵黄免疫球蛋白是一种高产、优质的多克隆抗体，而且鸡大规模工业化饲养成本低，经济方便，同时制备 789 的工艺相对简单。因此，789 在生物制品的开发和疾病的防治方面具有广阔的前景。应用卵黄抗体防治疾病也有不可避免的缺点，如可能带有蛋传染性疾病的病原，对养禽业存在潜在的威胁。

参考文献：（略）